产品货号:
QN4110
中文名称:
葡聚糖凝胶LH-20
英文名称:
Sephadex LH-20
产品规格:
25g|100g|500g
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
葡聚糖凝胶LH-20是在葡聚糖凝胶G-25的羟基上进行羟丙基化修饰。由于羟丙基的疏水性,使得凝胶在含有有机溶剂的流动相中保持一定的孔径,不再发生体积收缩,继续有分子筛的功能。因此葡聚糖凝胶LH-20可用于不同分子量的有机化合物的分离。
组分 | 25g | 100g | 500g |
葡聚糖凝胶LH-20 | 25g | 100g | 500g |
说明书 | 1份 |
保存:室温,有效期1年。
- 凝胶的预处理:
- 葡聚糖凝胶LH-20为干粉,初次使用前必须进行预处理。溶胀过程中严禁使用磁力搅拌,以免使微球破碎。
葡聚糖凝胶LH-20可加入足够的去离子水进行溶胀,室温3h以上,使其充分膨胀。样品1g在水中的溶胀体积是4.0~6.0mL,亦可选择甲醇进行溶胀,在甲醇中的溶胀体积是3.8~4.2mL,溶胀后的湿球平均粒径D50在90~110μm。如果葡聚糖凝胶LH-20使用前需要去除内毒素,溶胀后可用0.1M NaOH浸泡过夜,然后用去离子水清洗干净。将溶胀好的微球按照3∶1(v/v)加入水或缓冲液搅拌使其形成均匀的75%胶悬液。如果是重复使用的可以将20%乙醇倾去,加水或缓冲液搅拌均匀成75%的胶悬液。
- 层析柱的装填(使用储液器装填)
- 用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头,确保柱底筛板上无气泡,关闭柱底出口,并在柱底部留出1-2cm的去离子水。
- 将填料悬浮起来,小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减少气泡的产生。
- 如果使用储液器,应立即在层析柱和储液器中加满水,将进样分配器放置于浆液表面,连接至泵上,避免在分配器或进样管中产生气泡。
- 打开层析柱底部出口,开启泵,使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层析柱,然后缓慢增加至最终流速,这样可避免液压对所形成柱床的冲击,也可以避免柱床形成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速,可以用你所使用泵的最大流速,这样也可以得到一个很好的装填效果。在随后的色谱程序中,不要超过最大装柱流速的75%。当柱床高度稳定后,在最后的装柱流速下至少再上3倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。
- 关闭泵,关闭层析柱出口。
- 如果使用储液器,去除储液器,将分配器置于层析柱中。
- 将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器,锁紧分配器接头。
- 将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中,开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。
- 用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头,确保柱底筛板上无气泡,关闭柱底出口,并在柱底部留出1-2cm的去离子水。
- 纯化流程:
缓冲液:样品缓冲液或期望置换到的溶剂- 柱平衡:用缓冲液平衡5CV。
- 样品:上样量约为柱体积的1%~2%,为了增长填料的使用寿命,所用的样品推荐使用0.45μm的滤膜过滤。
- 洗脱:样品洗脱过程中使用的流速不要超过推荐的最大流速。当所有成分都洗脱出来后,凝胶柱即已再生,如仍用同一种缓冲液,色谱柱不需要再平衡。
- 柱平衡:用缓冲液平衡5CV。
- 清洗及保存:
葡聚糖凝胶LH-20装柱后可重复使用多次。
介质的保存:20%乙醇溶液2~8℃保存。
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